DNA印迹法
Southern印迹法(Southern blotting,DNA印迹法):是一种把DNA的电泳分离区带转移到支持膜上的技术。因为这一技术是英国科学家E.M.Southern首先创建的,而且这一转移过程与墨迹被吸印到吸墨纸上的过程相似,所以用他的姓氏命名为Southern印迹法。
Southern印迹法鉴定特定DNA的步骤为:
利用经典的琼脂糖凝胶电泳分离DNA片断后,可将DNA变性,通过Southern技术(根据E.M.Southern命名)转移到滤膜上。此过程的主要步骤是:
1. 将胶浸在碱性环境下,使双链DNA变性为单链DNA;
2. 将一含氮纤维素膜直接放在凝胶上,然后放几层吸水纸。当缓冲液通过毛细作用进入吸水纸时,DNA即被转移到滤膜上。
3. 通过同放射性标记的互补单链DNA探针温育,特定DNA序列的某些片断与探针杂交,通过放射自显影技术即可鉴定DNA。