米氏常数
Km物理含义
Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度,即当V=Vm/2时,【S】=Km,单位为mol/l。Km是酶极为重要的动力学参数,其物理含义是指FS复合物的消失速度(k1+k2)与形成速度(k1)之比。当PH、温度、离子强度不变时,Km是恒定的。
意义
它的数值等于酶促反应达到其最大速度Vm一半时的底物浓度〔S〕,图示以及公式推导。 它可以表示酶和底物之间的亲和能力,Km值越大,亲和能力越弱,反之亦然。 它可以确定一条代谢途径中的限速步骤:代谢途径是指由一系列彼此密切相关的生化反应组成的代谢过程,前面一步反应的产物正好是后面一步反应的底物,例如,EMP途径。限速步骤就是一条代谢途径中反应最慢的那一步,Km值最大的那一步反应就是,该酶也叫这条途径的关键酶。 它可以用来判断酶的最适底物,某些酶可以催化几种不同的生化反应,叫多功能酶,其中Km值最小的那个反应的底物就是酶的最适底物。 Km是一种酶的特征常数,只与酶的种类有关而与酶的浓度无关,与底物的浓度也无关,这一点与Vm是不同的,因此,我们可以通过Km值来鉴别酶的种类。但是它会随着反应条件(T、PH)的改变而改变。非竞争性抑制剂米氏常数不变,最大反应速度减小;反竞争性抑制剂米氏常数减小,最大反应速度减小
米氏常数 公卫考场
Km的意义及应用
(1)、活性中心被底物占据一半时的底物浓度。当V=1/2Vmax时,Km=[S]。
(2)、Km是特征常数,一般只与酶的性质、底物种类及反应条件有关,与酶的浓度无关。
(3)、Km可近似表示表示酶与底物的亲和力
Km=(K2+K3)/K1=Ks+K3/K1
当K1、K2>>K3时,Km近似等于Ks,因此,1/Km可近似表示酶与底物的亲和力大小
(4)、Km与天然底物
Km最小或最高Vm/Km比值的底物称之为该酶的最适底物或天然底物。
(5)、已知Km,可根据[S]推算V,或由V推算[S]
(6)、了解酶的Km及[S]推知是否受[S]调节
(7)、用于鉴别原级同工酶、次级同工酶。
(8)、测定不同抑制剂对某个酶的Km值的影响判断抑制类型(非竞争性抑制剂米氏常数不变,最大反应速度减小;竞争性抑制剂米氏常数增大,最大反应速度不变。)
(9)、催化可逆反应的酶:测定Km和[S]推测催化反应的方向及程度。
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